厭氧盒作為一種重要的實(shí)驗(yàn)室工具，主要用于在無(wú)氧或低氧環(huán)境下培養(yǎng)微生物，尤其是厭氧菌。其使用與操作要點(diǎn)涉及準(zhǔn)備階段、操作過(guò)程、注意事項(xiàng)等多個(gè)方面，以下是對(duì)這些要點(diǎn)的詳細(xì)闡述。

　　一、準(zhǔn)備階段

　　1.器材準(zhǔn)備：首先，需要準(zhǔn)備相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)器材，如培養(yǎng)基、試管、移液器、鑷子等，并確保這些器材已經(jīng)過(guò)高溫和高壓消毒，以保證實(shí)驗(yàn)的潔凈度。同時(shí)，厭氧盒本身也需要進(jìn)行清潔和消毒處理。

　　2.環(huán)境準(zhǔn)備：實(shí)驗(yàn)環(huán)境應(yīng)保持無(wú)菌，通常需要在超凈工作臺(tái)或無(wú)菌室內(nèi)進(jìn)行操作。此外，還需準(zhǔn)備好氮?dú)?、混合氣體（如N2:H2:CO2=85%:10%:5%）等氣體源，以及真空泵、流量計(jì)等輔助設(shè)備。

　　3.厭氧盒檢查：打開(kāi)厭氧盒前，應(yīng)檢查其密封性是否良好，確保無(wú)漏氣現(xiàn)象。同時(shí)，觀察該工具內(nèi)部的紫色色帶（如果有的話），確保其完整且未變色，這有助于判斷盒內(nèi)是否已達(dá)到厭氧狀態(tài)。

　　二、操作過(guò)程

　　1.放置樣品：在無(wú)菌操作環(huán)境下，將要進(jìn)行培養(yǎng)的微生物樣品用移液器均勻滴入培養(yǎng)盒中，注意控制樣品的體積，避免超過(guò)培養(yǎng)盒的最高液位線。

　　2.密封厭氧盒：將培養(yǎng)盒的蓋子迅速且緊密地蓋上，確保盒內(nèi)空氣被排出。在密封過(guò)程中，應(yīng)避免觸摸或移動(dòng)內(nèi)部的紫色色帶。

　　3.氣體置換：利用真空泵和氣體源進(jìn)行多次氣體置換，以排除盒內(nèi)的氧氣并充入氮?dú)饣蚧旌蠚怏w。通常需要進(jìn)行多次置換（如三次以上），以確保盒內(nèi)形成穩(wěn)定的厭氧環(huán)境。

　　4.催化除氧（如適用）：對(duì)于某些類型的厭氧盒，可能需要打開(kāi)內(nèi)置的除氧劑（如鈀粒除氧劑）和接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧。這一步驟有助于進(jìn)一步降低盒內(nèi)的氧含量。

　　5.培養(yǎng)觀察：將密封好的厭氧盒放入?yún)捬跖囵B(yǎng)箱中，設(shè)置好所需的溫度和時(shí)間等培養(yǎng)條件。在培養(yǎng)過(guò)程中，應(yīng)定期檢查該工具的密封性和厭氧狀態(tài)（如通過(guò)觀察紫色色帶是否變色）。培養(yǎng)結(jié)束后，打開(kāi)工具觀察微生物的生長(zhǎng)情況并進(jìn)行記錄和分析。

　　三、注意事項(xiàng)

　　1.無(wú)菌操作：整個(gè)操作過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范，避免雜菌污染。

　　2.氣體置換：在進(jìn)行氣體置換時(shí)，應(yīng)確保充入的氣體流量適中且穩(wěn)定，避免產(chǎn)生過(guò)大的氣流擾動(dòng)影響厭氧環(huán)境的形成。

　　3.密封性檢查：每次使用前和使用后都應(yīng)檢查厭氧盒的密封性是否良好，如有漏氣現(xiàn)象應(yīng)及時(shí)處理。

　　4.安全使用：在操作過(guò)程中應(yīng)注意安全用電和用氣避免發(fā)生觸電或氣體泄漏等安全事故。

　　5.定期維護(hù)：厭氧培養(yǎng)箱及其配套設(shè)備應(yīng)定期進(jìn)行清潔和維護(hù)保養(yǎng)以確保其正常運(yùn)行和延長(zhǎng)使用壽命。

　　厭氧盒的使用與操作要點(diǎn)涉及多個(gè)方面需要實(shí)驗(yàn)人員在操作前做好充分的準(zhǔn)備和檢查工作并嚴(yán)格遵守操作規(guī)程和注意事項(xiàng)以確保實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行和結(jié)果的準(zhǔn)確性。